产品货号:
YL0001
中文名称:
GelDyeRed红色核酸染料
英文名称:
10000×GelDyeRed in water
产品规格:
100μL|500μL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
GelDyeRed是一种高灵敏、无致突变性超安全和超稳定的荧光核酸凝胶染色试剂(在工作浓度中)。它可替代溴化乙锭(EB),具有远高于EB的灵敏度,同时不需要脱色。GelDyeRed和EB有相同的光谱特性,它替代EB不需要更换成像系统。
保存:室温,避光。
相关搜索:GelDyeRed红色核酸染料,红色核酸染料,,10000×GelDyeRed in water
组分 | 100μL | 500μL |
10000×GelDyeRed | 100μL | 500μL |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:室温,避光。
- 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
- TAE和TBE导电性能存在差异,如需缩短电泳时间,可选用TAE电泳缓冲液。
- 染料无需低温冷藏,请于室温下储存,以避免沉淀,若发现沉淀,请将染料加热至45~50℃,2min,振荡溶解,不影响使用效果。
- 本产品可以用来染色单链DNA和RNA,但它对单链DNA或RNA的灵敏度低于双链DNA。
- 胶染法(用法同EB)
- 制胶时每50mL琼脂糖凝胶中加入5μL 10000×GelDyeRed,并充分混匀。(GelDyeRed具有出色的热稳定性,可将试剂直接加入高温的凝胶溶液中,无需等待凝胶溶液冷却后再加入。也可采用将GelDyeRed预先与含有琼脂糖粉末的电泳缓冲液混合,加热制成。)
- 按照常规方法进行电泳。
- 制胶时每50mL琼脂糖凝胶中加入5μL 10000×GelDyeRed,并充分混匀。(GelDyeRed具有出色的热稳定性,可将试剂直接加入高温的凝胶溶液中,无需等待凝胶溶液冷却后再加入。也可采用将GelDyeRed预先与含有琼脂糖粉末的电泳缓冲液混合,加热制成。)
- 泡染法
- 按照常规方法进行电泳。
- 使用3×工作液染色,即将10000×GelDyeRed稀释约3,300倍到0.1M NaCl水溶液中。(例如若需要配置50mL泡染液,则需要将15μL 10000×GelDyeRed和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中。)
- 将凝胶小心地放入合适的容器中,加入足量的3×染色液浸没凝胶,为了缩短泡染时间,染色液可以预先加热至70℃左右,然后放入凝胶,孵育10min即可获得理想效果(若不加热,室温摇床孵育30min即可,若为丙烯酰胺凝胶,则需孵育30min到1h,并随丙烯酰胺含量增加而延长)。泡染染料用量较多,单次使用的染色液可重复使用3次左右。3×GelDyeRed染色液可以大量制备,在室温下保存直至用完。
注:
① 如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。
② 如果泡染染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度、选用更长的凝胶、延长凝胶时间以保证边缘清晰或改进上样技巧。
- 按照常规方法进行电泳。
- DNA条带迁移率受到影响?
- 为安全而设计的分子量较大的高效亲和型染料,在凝胶电泳中它们会影响DNA的迁移,建议用泡染法(后染)代替胶染法(前染)。
- 高分子量的DNA在低百分比的琼脂糖凝胶中的分离效果比较好,建议制百分比浓度小的琼脂糖凝胶。
- TBE缓冲液的缓冲能力比TAE缓冲液的效果更好,建议更换电泳缓冲液。
- 为安全而设计的分子量较大的高效亲和型染料,在凝胶电泳中它们会影响DNA的迁移,建议用泡染法(后染)代替胶染法(前染)。
- 为什么我看到的荧光弱,时间久了染料性能会降低,或者后染染色后有一层染料在胶上?
- 染料可能从溶液中沉淀出来,建议将溶液加热至45~50℃,保持2分钟,然后涡旋溶解。后期在室温下储存染料以避免沉淀。
- 凝胶的高背景染色可能是琼脂糖质量较差,琼脂糖中的污染物可能与染料结合,导致背景增加。
- 染料可能从溶液中沉淀出来,建议将溶液加热至45~50℃,保持2分钟,然后涡旋溶解。后期在室温下储存染料以避免沉淀。
- 后染法染色液可以重复使用吗?
可以。但是,如果灵敏度降低,请使用新鲜的染料溶液。 - 是否与克隆、连接和测序等下游应用兼容?
是。 - 我应该在我的6×DNA loading buffer中加入多少染料?
不建议将染料直接添加到上样缓冲液中,因为这会导致条带迁移不准确。我司提供6×GelDyeRed Prestain上样缓冲液(另购)产品,可以直接使用,若需要精确确定DNA大小,建议使用后染法。 - 检测下限是多少?
能够检测至少1ng DNA的条带。但是,染色的灵敏度取决于仪器功能和曝光设置。 - 前染胶是否可以重复电泳?
不建议,信号会随着后续电泳减弱。
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